产品介绍 探针法维容氏支原体实时定量pcr试剂盒 probe-quantitative real-time pcr kit for mycoplasma wenyonii
货号：mqt-wen-20 规格：20个反应 货号：mqt-wen-50 规格：50个反应 货号：mqt-wen-100 规格：100个反应 储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点： 1， 特异性检测维容氏支原体，准备样品时需注意不要污染其他动物血制品。 2， 灵敏度高，反应液中仅1个基因组时检出率为58%。线性范围跨越8个数量级。 3， 使用的dna聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。 4， 带有阳性对照样品（组分c），可用于检验试剂盒有效性。 5， 带有dutp和udg酶，可降低残留dna的污染。
嗜血支原体（hemotropic mycoplasma，或hemoplasma)是一类寄生于红细胞表面的细菌，无细胞壁，可以感染很多哺乳动物，包括猫、犬、猪、牛、羊等，也包括人类。嗜血支原体曾被命名为血巴通氏体（hemobartonella）和附红细胞体（eperythrozoon），根据16s rrna基因序列分析，被重新归类为支原体。在牛体内已发现的嗜血支原体有两种：维容氏支原体（mycoplasma wenyonii）和candidatus mycoplasma haemobos。 维容氏支原体，旧称维容氏附红细胞体（eperythrozoon wenyonii），**发现于1934年，目前为止仅在牛体内发现。血涂片检测结果显示，其游离于血浆或附着在红细胞表面，在全世界广发分布，可与无形体（anaplasma）、巴贝虫（babesia）和泰勒虫（theileria）形成共感染。多数情况下牛在感染后无临床表现，有时会出现贫血、发热、后肢水肿、乳头肿胀、产奶量突降和体重减轻等症状。感染后很难完全清除，可能终身带菌。一般认为吸血性节肢动物是其传播途径。 维容氏支原体尚无合适的体外培养方法，因此难以开发蛋白类检测方法。检测方法一般采用吉姆萨染色的血涂片法。血涂片法的检测灵敏度和特异性均比较差，容易受到人工制片方法和血液里其他成分（如：howell–jolly体）的干扰，且支原体易从红细胞表面脱落，造成漏检。而pcr法在灵敏度上则有明显的优势，且可以区分支原体种类。定量pcr法与普通pcr法相比，不仅可以精确定量，而且操作更为方便，更少受环境污染的影响。 本试剂盒基于16s rrna基因设计特异性引物和探针，可以准确识别维容氏支原体，与羊支原体（mycoplasma ovis）、猪支原体（mycoplasma suis）、以及寄生于梅花鹿的candidatus mycoplasma haemocervae和candidatus mycoplasma erythrocervae有交叉反应，而与candidatus mycoplasma haemobos及其他生物的基因组无交叉反应。检测时需注意严格操作，不污染其他动物的血源即可。对不同健康状况的牛群进行检测，在159只患致命贫血牛中获得133个阳性，在57只患不相关疾病牛中获得33个阳性，在61只健康牛中获得38个阳性，而在47只健康牛犊中只获得2个阳性。本试剂盒适用于维容氏支原体的检测。 本试剂盒包含热启动dna聚合酶、dntp（以dutp代替dttp）、引物、探针、阳性对照品、rox染料，和用以防止残余dna污染的udg（uracil- dna glycosylase，尿嘧啶-dna-糖基酶），用户只需准备好dna样品即可使用。 本试剂盒采用的dna聚合酶源自极端嗜热菌（thermus thermophilus），经改造后较普通的taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体，在室温下dna聚合酶活性被抑制。在pcr循环的热变性阶段，抗体受热被去除，此时dna聚合酶活性恢复，因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余dna的污染，提高pcr扩增效率、灵敏度和目的片段产量。 |
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